葉綠素測定儀的工作原理

根據葉綠體色素提取液對可見(jiàn)光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長(cháng)測定其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即
　　A＝αCL
　　式中：α比例常數。當溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(cháng)下的吸光系數可通過(guò)測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(cháng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(cháng)下的總吸光度等于各組分在相應波長(cháng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類(lèi)胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個(gè)特定波長(cháng)下的吸光度A，并根據葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素在該波長(cháng)下的吸光系數即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時(shí)為了排除類(lèi)胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(cháng)選擇葉綠素在紅光區的最大吸收峰。